煤地质环境微生物总基因组DNA提取方法的优化

• 作者: 吴瑞薇 杨秀清 王保玉 陈彦梅 韩作颖
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 煤地质环境微生物 基因组DNA提取 DNA质量 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 177-183
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-1145

摘要

高质量的DNA是进行分子生物学研究的基础.通过对传统DNA抽提方法(酚-氯仿法)进行改进,并以Rhodococcus sp.R04和煤粉为实验材料对细胞破碎条件进行优化,建立了一种可用于煤地质环境微生物基因组DNA高效提取的改良方法.以改良法和商业试剂盒提取煤地质环境微生物基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、细菌及古菌特异性片段的PCR扩增来评价所提取DNA的质量.改良法和试剂盒法均能获得煤地质环境微生物基因组DNA,并能用于多种特异性PCR扩增.与试剂盒提取的DNA相比,改良法获得的DNA片段主带明显,约占总DNA含量的50％,分子量大小接近23 kb,并且提取量大,约为试剂盒的5-10倍.同时,能用于如DNA文库构建和宏基因组测序等.此外,改良法所用试剂普通,价格便宜,提取的煤地质环境微生物基因组DNA质量较高,适于实验室和科学研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨秀清	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	34	203	7.0	13.0
2	王保玉		3	17	2.0	3.0
6	吴瑞薇	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	2	13	2.0	2.0
7	陈彦梅	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	2	6	2.0	2.0