基于核酸外切酶Ⅲ信号放大的比率型荧光传感器检测致病菌基因

• 作者: 刘亚青 牛晓娟 王硕 邓健康
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 大肠杆菌 致病菌基因 荧光共振能量转移 核酸外切酶Ⅲ 比率型荧光生物传感器
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 743-749
• 页数: 7页
• 字数: 3567字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.181091

摘要

食源性致病菌严重威胁着公众健康.本研究基于荧光共振能量转移原理,以Cy3和Cy5作为荧光供体和受体基团,利用核酸外切酶Ⅲ(Exo Ⅲ)增强检测信号,构建了比率型荧光传感器,用于高灵敏度检测致病菌基因.分别标记有Cy3的R1-DNA和标记Cy5的R2-DNA形成双链R1/R2,在Cy3的激发光波长激发下,由于发生荧光共振能量转移,Cy3的荧光被猝灭而产生Cy5的荧光信号.致病菌靶基因(大肠杆菌Lac Z 基因)的存在可将R1/R2双链解旋,使得Cy3远离Cy5,导致Cy3的荧光恢复而Cy5的荧光信号降低.在ExoⅢ作用下,Cy3与 Cy5的信号变化进一步增大.在优化的实验条件下,荧光信号变化与靶基因在10~2000 pmol/L浓度范围内呈现良好的线性关系,检出限为5.29 pmol/L.所采用的比率型信号检测策略极大地降低了假阴性、假阳性检测结果的产生,增强了检测特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓健康		1	1	1.0	1.0
2	牛晓娟		1	1	1.0	1.0
3	刘亚青		1	1	1.0	1.0