烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系产生肿瘤坏死因子α、活化信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶的影响

• 作者: 刘宇甄 曾荣 李岷 杜蕾蕾 段志敏 王丽玮 童建波 陈青
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 烟曲霉菌 肿瘤坏死因子α p38丝裂原活化蛋白激酶类 THP-1细胞
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 653-657
• 页数: 5页
• 字数: 3791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.09.004

摘要

目的 探讨烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和细胞内信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活的影响.方法 106、107 CFU/ml烟曲霉悬液(106和107 CFU/ml烟曲霉组)、100 mg/L阳性刺激物β-葡聚糖(β-葡聚糖组)及培养基(空白对照组)分别与2×105/ml THP-1细胞共孵育1、3、6h,实时荧光定量PCR分析各组THP-1细胞TNF-αmRNA表达水平.107 CFU/ml烟曲霉悬液(烟曲霉组)、β-葡聚糖(β-葡聚糖组)及培养基分别作用THP-1细胞24 h,酶联免疫吸附法检测各组培养上清液中TNF-α含量.Western印迹法检测107 CFU/ml烟曲霉体外作用THP-1细胞后15、30、60 min p38MAPK和磷酸化p38MAPK水平.采用20 μmol/LSB203580预先与THP-1细胞共培养2h后,再用107 CFU/ml烟曲霉、β-葡聚糖或培养基作用6h,检测各组THP-1细胞TNF-α mRNA表达水平变化.结果 106、107 CFU/ml烟曲霉组、100 mg/L β-葡聚糖组及空白对照组TNF-α mRNA表达水平差异有统计学意义(F=110.983,P＜0.001),且随培养时间延长,THP-1细胞TNF-α mRNA水平增高(F=701.680,P＜0.001).107 CFU/ml烟曲霉刺激THP-1细胞24 h后,TNF-α蛋白水平(6 236.30±437.12 ng/L)较空白对照组(132.10±0.61 ng/L)明显升高(P＜0.01).107 CFU/ml烟曲霉作用THP-1细胞30 min后磷酸化p38MAPK蛋白水平明显升高,60 min时开始减弱.SB203580阻断的烟曲霉组TNF-α mRNA表达水平(3.83 ± 0.62)较未阻断的烟曲霉组(187.23±21.62)明显降低.结论 人THP-1细胞体外与烟曲霉作用后激活信号分子p38MAPK并分泌TNF-α,表明单核细胞可能参与抗烟曲霉感染固有免疫反应.