CD137信号通过外泌体传递活化T细胞核因子c1介导小鼠血管平滑肌细胞钙化

• 作者: 严金川 仲威 崔星钢 李波 杨萍 王中群 王宁 许尧 邵晨
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD137信号 外泌体 活化T细胞核因子c1 血管平滑肌细胞 钙化
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 血管钙化专栏
• 页码范围: 1194-1200,1244
• 页数: 8页
• 分类号: R363
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2018.12.003

摘要

目的 探讨外泌体在CD137信号诱导的小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化中的作用.方法 组织贴壁法提取小鼠胸主动脉VSMC,将细胞分为2组,即对照组和CD137激动组,用试剂盒提取外泌体,并用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析法及Western blot鉴定和分析,荧光显微镜观察VSMC摄取外泌体.构建活化T细胞核因子c1(sh-NFATc1)慢病毒载体并感染VSMC.实验分为3组:对照组外泌体处理组、CD137激动组外泌体处理组、沉默NFATc1+CD137激动组外泌体处理组.采用Western blot检测α平滑肌肌动蛋白(αt-SMA)、骨形成蛋白2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(Runx-2)蛋白表达量.Von Kossa染色检测VSMC内钙盐沉积情况.结果 Western blot结果显示,2组微囊泡均表达外泌体表面标记蛋白CD9、CD81;电镜下外泌体成圆形和杯托状,直径在30～100 nm;CD137激动组外泌体中NFATc1蛋白表达显著增多.与对照组外泌体处理组比较,CD137激动组外泌体处理组钙化相关指标BMP-2、Runx-2蛋白表达显著增高,同时α-SMA表达显著下降;与CD137激动组外泌体处理组比较,沉默NFATc1 +CD137激动组外泌体处理组BMP-2、Runx-2蛋白表达显著减少,α-SMA表达显著增高.Von Kossa染色结果显示,CD137激动组外泌体处理组VSMC钙盐沉积多于对照组外泌体处理组,而沉默NFATc1 +CD137激动组外泌体处理组钙盐沉积比CD137激动组外泌体处理组显著降低.结论 CD137信号通路通过外泌体转运NFATc1介导VSMC钙化.