一种测定转基因作物中CaMV35S启动子甲基化水平的方法

• 作者: 彭于发 杨继彦 谢家建 黄春蒙
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: CaMV35S启动子 甲基化 转基因作物 HpyCH4Ⅳ 甲基化敏感内切酶定量PCR扩增(MSRE-qPCR)
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 1258-1264
• 页数: 7页
• 分类号: S-3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.07.018

摘要

来源于花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus)的CaMV35S启动子是目前商业化转基因作物中最常用的启动子,对其甲基化水平的测定是研究转基因沉默的重要内容之一.本研究通过甲基化敏感内切酶HpyCH4Ⅳ酶切和实时荧光定量PCR扩增技术,建立了CaMV35S启动子甲基化水平的快速测定方法.利用建立的方法分析了我国安徽省2017年市场的棉花(Gossypium hirsutum)种子,发现部分种子中CaMV35S启动子甲基化处于较高水平.本研究为实现转基因材料中CaMV35S启动子甲基化的快速高通量筛查提供了检测方法.基于相同的原理也可以建立其他转基因元件和DNA序列甲基化水平的快速检测方法.