miR-15a对猪卵泡颗粒细胞BDNF基因表达的影响

• 作者: 安娜 李俊 李冬冬 王文绍 程玲 索川 苏娟 赵肖 雷治海 马志禹
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: miR-15a 卵泡闭锁 猪卵巢颗粒细胞 转染 BDNF
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 14-19
• 页数: 6页
• 分类号: S852.16+3
• 字数: 4311字
• 语种: 中文

摘要

为探索miR-15a对猪卵泡发育的影响,选取健康大卵泡、中等卵泡和闭锁卵泡,研究不同卵泡中miR-15a的相对表达量以及其是否对卵巢颗粒细胞中有BDNF表达具有调节作用.分别抽取直径3--5 mm、大于5 mm健康卵泡和3--5 mm闭锁猪卵泡,采用qPCR检测发现闭锁卵泡中miR-15a表达显著升高.免疫组化结果显示中等健康卵泡颗粒细胞上BDNF、TrKB均有表达,而在靠近卵泡腔的凋亡颗粒细胞BDNF免疫阳性反应较弱.分离培养猪卵巢颗粒细胞,过表达miR-15a能显著上调BDNF基因表达水平,Bcl-2基因表达有下降趋势但差异不显著;抑制miR-15a表达能显著抑制BDNF、bcl-2基因表达水平.Western-Blot结果发现,过表达miR-15a显著下调BDNF蛋白水平,而抑制miR-15a表达则能显著上调BDNF蛋白水平.实验结果显示miR-15a可能经由其靶基因BDNF参与猪卵泡的发育和闭锁.