喜树碱对人原代角质形成细胞自噬的影响

• 作者: 孙颖 张梁宇 王翔 童云峰 郝阳阳 陈杨
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 银屑病 喜树碱 自噬 细胞增殖 细胞凋亡 角蛋白细胞
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 510-514
• 页数: 5页
• 字数: 4327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.07.007

摘要

目的 探讨喜树碱对人原代角质形成细胞(HPK)自噬的影响.方法 取健康男性包皮组织,采用两步消化法分离提取HPK,取第3代细胞用于实验.将HPK分为实验组和对照组,实验组用200 nmol/L、2μmol/L、6μmol/L喜树碱处理,对照组用0.1％二甲基亚砜(DMSO)处理.处理24、48 h后,采用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测药物作用24h后细胞凋亡;免疫印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62变化.选取2μmol/L喜树碱作用HPK 24 h,间接免疫荧光法检测LC3蛋白变化,透射电镜观察自噬体超微结构,进一步确认喜树碱对自噬的诱导效应.结果 随着喜树碱浓度的增加,对HPK的增殖抑制作用逐渐增强,各组24 h增殖抑制率总体差异有统计学意义(F=152.9,P＜0.01),其中2、6μmol/L组高于对照组,差异有统计学意义(t=12.09、18.76,均P＜ 0.01),200 nmol/L组与对照组差异无统计学意义(t=2.24,P＞0.05).48 h时各组增殖抑制率总体差异有统计学意义(F=123.8,P＜0.01),实验组均高于对照组(均P＜0.01).对照组和200 nmol/L、2μmol/L、6 μmol/L喜树碱组24 h细胞凋亡率分别为(2.30±1.68)％、(15.90±2.14)％、(29.33±3.51)％、(35.28±3.05)％,差异有统计学意义(F=89.57,P＜0.01),各实验组与对照组比较差异均有统计学意义(均P＜ 0.01).2、6μmol/L喜树碱处理细胞24 h后,LC3Ⅱ蛋白显著上调,p62蛋白表达下调.间接免疫荧光检测显示,2 μmol/L喜树碱组与对照组自噬体阳性细胞比例分别为(60.16±8.78)％、(38.96±13.12)％,差异有统计学意义(t=3.003,P＜0.05).透射电镜观察到2μmol/L喜树碱作用细胞24 h后细胞内形成自噬体和自噬溶酶体.结论 2、6 μmol/L喜树碱可诱导HPK自噬水平升高,同时抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙颖	解放军第九八医院皮肤科	23	109	7.0	10.0
2	张梁宇	解放军第九八医院皮肤科	13	42	4.0	5.0
3	王翔	解放军第九八医院药械科	20	49	5.0	6.0
4	陈杨	解放军第九八医院皮肤科	6	13	2.0	3.0
5	童云峰	解放军第九八医院皮肤科	1	0	0.0	0.0