橡胶树中碱性转化酶基因HbNIN8的克隆与表达分析

• 作者: 秦云霞 邹智 阳江华 龙翔宇
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 巴西橡胶树 中碱性转化酶 HbNIN8 叶绿体
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 2421-2426
• 页数: 6页
• 分类号: S794.1
• 字数: 4175字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.12.014

摘要

蔗糖是高等植物光合产物的重要存储方式,而转化酶和蔗糖合酶是水解蔗糖的主要酶.研究基于橡胶树的基因组和转录组数据,采用RT-PCR技术克隆到一个中碱性转化酶基因HbNIN8的全长cDNA.该基因预测编码630个氨基酸.同源和亚细胞定位分析表明,HbNIN8属于 α 类中碱性转化酶,叶绿体定位.应用毕赤酵母真核表达获得其重组蛋白,分析了其酶活性特点,HbNIN8在毕赤酵母中重组蛋白的最适pH为7.5,最适温度为45℃.实时荧光定量PCR分析表明,HbNIN8主要在叶片中表达,其表达量随着叶片的成熟而逐渐增加,在稳定期叶片中达到最大,在成熟叶片中,HbNIN8的表达呈现明显的昼夜差异,晚上的表达水平相对高于白天.因此,HbNIN8很可能是负责将叶绿体中的蔗糖水解为单糖,从而调控橡胶树叶绿体内蔗糖和淀粉的分配.