摘要:
目的 研究普拉克索片对帕金森病(PD)细胞模型的线粒体保护作用.方法 PC12细胞经0.16 nmol·L-11-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)作用48 h建立PD细胞模型,低、中、高剂量实验组分别加入0.50×10-1,0.10,0.50 mmol·L-1普拉克索片,模型组加等量生理盐水,另设正常PC12细胞为对照组.以溴化四唑蓝比色(MTT)法检测细胞增殖,以荧光标记和偏振法检测细胞线粒体膜流动性、膜电位,以蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白表达.结果 低剂量实验组培养24,48 h细胞存活率分别为(73.47±3.63)%,(72.65±3.17)%,均高于模型组的(54.35±3.67)%,(52.17±2.65)%.低剂量实验组细胞线粒体膜荧光偏振度、微黏度、相对荧光强度分别为(0.53±0.06) Pola,(3.23±0.53)P·s-1,503.25±45.67,模型组分别为(0.64 ±0.15)Pola,(5.87±1.36)P·s-1,369.87±33.26,差异均有统计学意义(均P<0.05).与模型组相比,实验组细胞存活率升高,且随普拉克索片作用浓度的升高呈逐渐升高趋势(P<0.01).与对照组比较,模型组细胞线粒体膜荧光偏振度和微黏度升高,膜电位降低(P<0.01);实验组随普拉克索片干预浓度的增大线粒体膜荧光偏振度和微黏度逐渐降低,膜电位逐渐升高,且与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).对照组、模型组和实验组PC12细胞胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白相对表达量分别为0.36±0.11,0.58±0.19,0.41±0.08,0.39 ±0.09,0.35±0.09;与对照组比较,模型组Caspase-3蛋白相对表达量升高(P<0.05),与模型组比较,实验组Caspase-3蛋白相对表达量降低,且随普拉克索作用浓度增加呈逐渐降低趋势(P<0.05).结论 普拉克索片可促进PD模型细胞增殖,同时可改善细胞线粒体结构与功能,进而起到抗细胞凋亡的保护作用.