基于恒温隔绝式荧光PCR技术的猪流行性腹泻病毒检测方法的建立及应用

• 作者: 于新友 吴信明 李天芝 王金良
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 检测 荧光RT-PCR
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 78-81
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3583字
• 语种: 中文

摘要

为建立猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)快速检测方法,参照GenBank中PEDV的N基因序列,设计引物及TaqMan探针,优化反应条件,建立了快速检测PEDV的荧光RT-PCR方法,并验证该法的敏感度、特异性和重复性.结果显示:该方法最佳反应体系为上游引物各1.5 μL,下游引物各1.8 μL,探针0.7 μL,酶1μL,缓冲液12.5 μL,模板2μL,补足DEPC水至25μL,获得的标准曲线方程为Ct=-3.15×lg拷贝数+31.72,检测PEDV的敏感度可达0.32 TCIDs0/100 μL,特异性好,对其他猪常见病毒检测结果均为阴性.结果表明:该方法适合猪流行性腹泻快速检测,为该病的诊断和防控奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王金良		154	750	13.0	19.0
2	吴信明		22	59	4.0	7.0
3	李天芝		193	258	6.0	8.0
4	于新友		198	275	6.0	8.0