表达A型产气荚膜梭菌FBA蛋白的延迟裂解型沙门菌载体的构建

• 作者: 姚心茹 姜延龙 曾庆丰 杨桂连 王占楠 王成宇 王春凤 王棋 胡译文
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: A型产气荚膜梭菌 FBA 原核表达 多克隆抗体 延迟裂解型沙门菌
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 906-910
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.05.12

摘要

利用PCR技术扩增FBA基因序列,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,获得pET-30a-FBA重组质粒.将重组质粒转化到BL21感受态细胞中,经IPTG诱导表达His-FBA蛋白,通过His-tag Ni柱亲和层析纯化后,免疫新西兰大白兔制备FBA特异性多克隆抗体.再利用PCR技术将FBA基因与表达载体pYA3681连接,构建了表达载体pYA5129,电转至延迟裂解性沙门菌x11802后以制备的FBA多抗为一抗进行免疫印迹试验,验证了其免疫原性;同时比较了不同浓度阿拉伯糖对重组沙门菌生长性能的影响,优化了阿拉伯糖最佳添加浓度,为后续研究其作为肉鸡坏死性肠炎疫苗的可行性奠定基础.