梅花鹿MMP-2催化域的基因克隆及原核表达

• 作者: 王佳雯 王敏 王新宇 赵雨 高云鹏
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 梅花鹿 基质金属蛋白酶2 催化域 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 49-53
• 页数: 5页
• 分类号: S825
• 字数: 3273字
• 语种: 中文

摘要

为了研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)与鹿茸生长发育之间的关系,构建MMP-2催化域原核表达载体,采用RT-PCR方法从鹿茸cDNA中扩增MMP-2的催化域基因,使用NdeⅠ和NotⅠ酶切位点连入原核表达载体pET30a并进行诱导表达.结果显示:梅花鹿MMP-2的催化域与牛、山羊、大鼠、人、马、猪和绵羊等多个物种的MMP-2催化域进化上较为保守,氨基酸同源性分别为98.4％、99.5％、94.0％、96.2％、95.9％、96.4％和99.2％;重组表达的MMP-2 CD带有His标签,蛋白共有377个氨基酸,预测大小为42.04ku,理论等电点为4.95;通过转化BL21感受态细胞和IPTG诱导,成功表达了目的蛋白,约占菌体蛋白的80％;经过SDS-PAGE检测和免疫印迹分析,发现目的蛋白主要表达在包涵体中.本试验为后续蛋白纯化及活性检测,进一步研究MMP-2在鹿茸生长中的作用提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵雨	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	137	528	12.0	17.0
2	王佳雯	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	16	7	2.0	2.0
3	王敏	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	8	5	1.0	2.0
4	高云鹏	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	6	2	1.0	1.0
5	王新宇	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	3	1	1.0	1.0