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摘要:
建立一种快速、高效测定游离氨基酸含量的异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱法,并利用此方法分析检测iturin A发酵过程中游离氨基酸的动态变化.以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Venusil-AA(4.6 mm×250 mm,5μm)氨基酸分析专用柱,并优化HPLC检测色谱条件.结果表明:梯度洗脱程序、流动相pH值、色谱柱温对分析时间、色谱峰分离及峰型具有重要影响.当最优色谱条件为:流动相A为0.1 mol/L无水乙酸钠缓冲溶液(pH6.4±0.1)-乙腈(66∶5),流动相B为乙腈-水(4∶1),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,色谱柱温40℃,梯度程序洗脱,35 min内可完全分离16种氨基酸,且各氨基酸在一定浓度范围内线性关系良好(R2均大于0.9986),加标回收率在83.84%-108.02%之间,RSD值均小于2.77%.该方法耗时短、操作简便、准确可靠,具有良好的精密度和稳定性.通过此方法研究分析伊枯草菌素A发酵过程中各游离氨基酸含量变化规律,发现其氨基酸浓度变化规律大致分为三类.
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文献信息
篇名 伊枯草菌素A发酵过程中游离氨基酸的HPLC分析
来源期刊 生物技术通报 学科
关键词 异硫氰酸苯酯 高效液相色谱法 游离氨基酸 伊枯草菌素A
年,卷(期) 2018,(8) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 151-158
页数 8页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0012
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 谭红 中国科学院成都生物研究所 37 447 13.0 20.0
2 周金燕 中国科学院成都生物研究所中国科学院环境与微生物重点实验室 29 177 8.0 12.0
3 赵杰 中国科学院成都生物研究所中国科学院环境与微生物重点实验室 30 470 12.0 21.0
7 岳华 中国科学院成都生物研究所中国科学院环境与微生物重点实验室 5 4 1.0 1.0
11 苟学磊 中国科学院成都生物研究所中国科学院环境与微生物重点实验室 1 1 1.0 1.0
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节点文献
异硫氰酸苯酯
高效液相色谱法
游离氨基酸
伊枯草菌素A
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生物技术通报
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1985
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