N-糖基化改造碱性果胶酶的热稳定性

• 作者: 堵国成 昂安娜 朱龙宝 朱龙龙 江志超 葛飞 陶玉贵 马琪森
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 碱性果胶酶 N-糖基化 热稳定性 增强芳香族序列(enhanced aromatic sequence EAS)
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 22-28
• 页数: 7页
• 字数: 5563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.016290

摘要

在软件模拟分析的基础上,运用半理性设计转换传统去除N-糖基化的方式,同时在反向转角区引入具有增强芳香族序列(enhanced aromatic sequence,EAS)特征的新N-糖基化,提高了碱性果胶酶(alkaline polygalac-turonate lyase,PGL)的热稳定性,获得了高品质的PGL工程菌.将355位点的苏氨酸突变成突变能低的色氨酸来去除353位点的N-糖基化,酶的半衰期提高了176％,但与目标值仍相距甚远;再将127和137位点同时引入新N-糖基化,使酶的半衰期达到1.35 h,与目标值接近.在酶的反向转角区引入具有EAS特征的新N-糖基化,对提高酶的热稳定性具有显著促进作用.