重组胶原酶Bacillus cereus ColM13的酶学及结构特性分析

• 作者: 代晓凝 刘丽莉 孟圆圆 李玉 杨陈柳 梁严予 陈珂
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 工程菌pET30a-ColM13/BL21 重组胶原酶ColM13 胶原蛋白 酶学 结构特性
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 16-21
• 页数: 6页
• 字数: 3874字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.016065

摘要

以前期成功构建出降解胶原蛋白的工程菌pET30a-ColM13/BL21为出发菌,对工程菌表达纯化出的重组胶原酶(ColM 13)的酶学性质进行分析.通过研究温度、pH、抑制剂对其的影响,得出ColM13的最适反应温度为50℃,最适反应pH为8.0;在20 ～55℃和pH6.0 ～9.0范围内有良好的稳定性;金属蛋白酶抑制剂乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)、乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(ethylenebis(oxyethylenenitrilo tetraacetic acid,EGTA)对ColM13有显著的抑制作用.采用紫外光谱(ultraviolet and visible spectrum,UV)、差示量热扫描(differential scanning calorimeter,DSC)、荧光光谱(FS)、傅里叶红外光谱(FT-IR)对骨胶原蛋白及其酶解产物进行结构特性分析,分析可知酶解作用使骨胶原蛋白的三股螺旋结构遭到破坏,释放出大量的游离氨基酸.酶解后胶原蛋白的肽链上-NH2+-相互排斥减弱,疏水氨基酸残基作用增强,具有更高的热稳定性.与B.cereus MBL13-U分离纯化出的胶原酶(BSC)相比,ColM13处理的胶原蛋白的降解效果更明显.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丽莉	河南科技大学食品与生物工程学院	86	470	12.0	18.0
2	杨陈柳	河南科技大学食品与生物工程学院	8	15	3.0	3.0
3	梁严予	河南科技大学食品与生物工程学院	8	12	2.0	3.0
4	李玉	河南科技大学食品与生物工程学院	9	7	1.0	2.0
5	孟圆圆	河南科技大学食品与生物工程学院	10	13	2.0	2.0
6	代晓凝	河南科技大学食品与生物工程学院	10	12	2.0	2.0
7	陈珂	河南科技大学食品与生物工程学院	10	18	2.0	3.0