组织抑制因子-1siRNA对脓毒症血清诱导内皮细胞损伤的影响

• 作者: 余旻 易梦秋
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 基质金属蛋白酶-9 组织抑制因子-1 血栓调节蛋白 脓毒症 血清 内皮细胞 细胞外基质 siRNA
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 876-880
• 页数: 5页
• 字数: 4247字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.08.012

摘要

目的 探讨siRNA干扰组织抑制因子-1 (TIMP-1)的表达对脓毒症血清诱导人脐静脉内皮细胞损伤的影响及其机制.方法 制备脓毒症患者的血清和健康志愿者的血清,体外培养人脐静脉内皮细胞株(HUVECs),随机分为空白组(正常培养)、对照组(10％健康志愿者血清干预)、脓毒症组(10％脓毒症患者血清干预)、阴性对照组(阴性siRNA转染+10％脓毒症患者血清干预)、TIMP-1 siRNA组(TIMP-1 siRNA转染+10％脓毒症患者血清干预).四唑盐比色(MTT)法检测内皮细胞的存活率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及TIMP-1的含量;蛋白免疫印迹(Westem blot)法检测内皮细胞MMP-9、TIMP-1及血栓调节蛋白(TM)的表达.结果 与对照比较,脓毒症组内皮细胞存活率于12h开始下降(P＜0.05),48 h降至最低(P＜0.01),培养上清液中MMP-9及TIMP-1含量升高(P＜0.01),MMP-9及TIMP-1蛋白表达上调(P＜0.01),TM蛋白表达下调(P＜0.01);与脓毒症组比较,TIMP-1 siRNA组内皮细胞存活率下降(P＜0.05),培养上清液中MMP-9含量升高(P＜0.05),TIMP-1含量降低(P＜0.05),MMP-9蛋白表达上调(P＜0.01),TIMP-1及TM蛋白表达下调(P＜0.01).结论 TIMP-1在脓毒症血清诱导的内皮细胞损伤中发挥保护作用.