OEPR法构建含不同破伤风毒素T细胞表位的CPB表达质粒及其产物的初步鉴定

• 作者: 彭国瑞 彭小兵 李旭妮 董令赢 蒋玉文
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 产气荚膜梭菌β毒素 破伤风毒素T细胞表位 OEPR法
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 33-38,中插4
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.91
• 语种: 中文

摘要

为了提高产气荚膜梭菌β毒素(CPB)亚单位疫苗的免疫效果,试验将不同破伤风毒素辅助性T细胞表位引入该蛋白前,用OEPR (Overlap Extension PCR and Recombination)法构建了8个重组表达质粒(即pCold-CPB、pCold-P2-CPB、pCold-P21-P30-P2-CPB、pCold-P32-P23-P21-P30-P2-CPB和pET22b-CPB、pET22b-P2-CPB、pET22b-P21-P30-P2-CPB、pET22b-P32-P23-P21-P30-P2-CPB).将阳性重组质粒转入到大肠杆菌中,以自诱导培养基表达目的蛋白.SDS-PAGE分析结果表明,8个重组菌均成功表达出目的蛋白,且大小均与预期一致.Western Blotting检测结果表明,重组蛋白均可被C型产气荚膜梭菌阳性血清识别.毒性试验结果表明,重组蛋白均可致死小鼠.本研究首次用OEPR法成功构建了8个含不同破伤风毒素T细胞表位的产气荚膜梭菌β毒素表达质粒,并成功表达了目的蛋白,为探索破伤风毒素辅助性T细胞表位对产气荚膜梭菌β毒素免疫效果的影响及进一步开发亚单位疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭妮		22	53	5.0	6.0
2	蒋玉文		72	389	11.0	17.0
3	彭小兵		35	163	6.0	12.0
4	彭国瑞		29	37	3.0	4.0
5	董令赢		7	1	1.0	1.0