同步检测动物源性成分的五重PCR的条件优化和检出限分析

• 作者: 吴文慧 唐雪明 张俊沛 李文 王荣谈 王金斌 白蓝
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 动物源性成分 五重PCR 优化 检出限
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 506-514
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2018.03.0506

摘要

为获得肉制品中牛、羊、猪、鸡、鸭等动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用5对牛、羊、猪、鸭和鸡等动物源性成分特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组),对多重PCR反应条件引物浓度和退火温度进行优化,并确定该检测方法的检出限.结果表明,多重PCR方法最佳反应条件为鸭源特异性引物浓度0.12 μmol·L-1,鸡源特异性引物浓度0.16 μmol· L-,猪源特异性引物浓度0.16 μmol·L-1,羊源特异性引物浓度0.32 μmol·L-,牛源特异性引物浓度0.24 μmol·L-1,退火温度58℃,dNTPs浓度0.20 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶添加量5U,循环次数40.在最佳反应条件下,所建立的牛、羊、猪、鸡和鸭等5种动物源性成分多重PCR的gDNA检出限达到20 pg.应用优化后的多重PCR方法对21份市售肉制品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性,结果与现行标准的检测结果一致,掺假率达42.86％.本试验结果为肉制品中该5种动物源性成分的快速检测提供了技术支撑.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王荣谈		10	52	3.0	7.0
2	唐雪明	上海市农业科学院生物技术研究所	15	120	7.0	10.0
4	王金斌	上海市农业科学院生物技术研究所	7	58	5.0	7.0
8	白蓝	上海市农业科学院生物技术研究所	1	6	1.0	1.0
9	李文		2	25	2.0	2.0
10	张俊沛	上海市农业科学院生物技术研究所	1	6	1.0	1.0
11	吴文慧	上海海洋大学食品学院	1	6	1.0	1.0