靶向敲除猪ApoE基因的CRISPR/Cas9系统构建及基因组检测

• 作者: 代冬梅 张智英 王昕 闫强 雒志新
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: ApoE CRISPR/Cas9 报告载体系统 基因敲除
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 11-17
• 页数: 7页
• 分类号: S811.5
• 字数: 3788字
• 语种: 中文

摘要

通过敲除猪的ApoE基因,为后期构建ApoE缺陷型动物模型奠定基础.利用CRISPR/Cas9系统和实验室前期构建的报告载体,分别构建了靶向猪ApoE基因的两个CRISPR/Cas9表达载体和相应的报告载体.通过CRISPR/Cas9表达载体和RG (Red-GFP)报告载体转染HEK 293T细胞荧光观察结果显示,构建的CRISPR/Cas9表达载体均有较高的活性,进一步在流式细胞仪上检测其活性分别为6.50％和6.83％.将CRISPR/Cas9表达载体和RPG(Red-PuroR-GFP)报告载体转染PK15细胞系,经过嘌呤霉素药物筛选后,对富集到的细胞进行基因组检测.结果显示本系统能够对猪PK15细胞中的ApoE基因进行有效的敲除,其敲除效率分别为40％、53.3％.试验结果可为ApoE敲除猪动物模型的构建提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王昕	西北农林科技大学动物科技学院	46	439	11.0	20.0
2	张智英	西北农林科技大学动物科技学院	28	36	4.0	4.0
3	雒志新	西北农林科技大学动物科技学院	3	2	1.0	1.0
4	闫强	西北农林科技大学动物科技学院	3	2	1.0	1.0
5	代冬梅	西北农林科技大学动物科技学院	1	1	1.0	1.0