土壤微生物中新型β-葡萄糖苷酶的挖掘与鉴定

• 作者: 冯治洋 曹明明 王绍琛 王霏
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 宏基因组学 功能性筛选 B-葡萄糖苷酶 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 环境微生物学
• 页码范围: 71-80
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.170153

摘要

[背景]通过培养微生物来获得新p-葡萄糖苷酶因只有少部分微生物可以被培养而受到限制,但宏基因组学技术可以挖掘非培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶资源.[目的]利用宏基因组学技术挖掘土壤微生物来源的新型p-葡萄糖苷酶,并对其酶学性质进行初步分析.[方法]构建土壤微生物的宏基因组文库,利用七叶苷平板显色法对所构建的文库进行筛选获得阳性克隆,并对阳性克隆所含的p-葡萄糖苷酶基因进行异源表达和生物化学特性分析.[结果]通过筛选文库中的62万个克隆,获得一个具有β-葡萄糖苷酶活性的克隆,其插入片段中包含一个2 301 bp的ORF (YNBG3),蛋白同源性分析显示其属于β-葡萄糖苷酶第三家族.对YNBG3酶的生化分析确定其最佳反应温度为53℃,最适pH为5.2,有较好的热稳定性,对一定浓度范围内的DMSO、丙酮、乙醇等有机试剂有较好的耐受性,EDTA和尿素可增加该酶的活性.[结论]利用宏基因组学技术获得了一个有较好热稳定性及耐受一定浓度有机试剂和尿素的新β-葡萄糖苷酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王绍琛	南京农业大学食品科技学院	7	64	4.0	7.0
2	冯治洋	南京农业大学食品科技学院	8	9	2.0	3.0
3	曹明明	南京农业大学食品科技学院	5	9	2.0	3.0
4	王霏	南京农业大学食品科技学院	1	4	1.0	1.0