摘要:
目的:研究葛根素联合γ突触核蛋白(synuclein gamma,SNCG)siRNA对膀胱癌细胞生长的影响.方法:用0,100,200,400,800,1600 μg/mL的葛根素培养液培养膀胱癌细胞,以MTT法检测细胞增殖变化并计算半数抑制浓度.在膀胱癌细胞中转染SNCG siRNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒,以实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western印迹法检测干扰效果.用半数抑制浓度的葛根素处理稳定转染SNCG siRNA重组慢病毒的膀胱癌细胞,MTT法检测细胞增殖变化,平板克隆试验检测细胞克隆形成能力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化,Western印迹法检测细胞中活化的caspase-3 (C-caspase-3)、活化的caspase-9(C-caspase-9)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白表达水平.结果:100,200,400,800,1 600 μg/mL的葛根素处理后的膀胱癌细胞存活率均低于0μg/mL处理组(P<0.05),其半数抑制浓度为(587.26±61.45)μg/mL.转染SNCG siRNA重组慢病毒的膀胱癌细胞中SNCG表达水平低于转染阴性对照重组慢病毒的膀胱癌细胞(P<0.05).下调SNCG或葛根素处理后的膀胱癌细胞增殖能力和克隆形成能力均降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-caspase-3,C-caspase-9,Bax蛋白水平也升高.与下调SNCG或葛根素处理后的膀胱癌细胞比较,葛根素处理下调SNCG的膀胱癌细胞的增殖和克隆形成能力均降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-caspase-3,C-caspase-9,Bax蛋白表达水平也升高.结论:葛根素联合SNCG siRNA能够抑制膀胱癌细胞生长、诱导膀胱癌细胞凋亡.