SMAD基因家族PCR引物设计及其在非小细胞肺癌中的表达

• 作者: 刘振波 林高阳 袁方 高大登
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 非小细胞肺癌 聚合酶链式反应 果蝇母源抗生物皮肤生长因子基因
• 年，卷（期）: 2018,（24）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3948字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2018.24.007

摘要

目的 自行设计并验证SMAD基因家族PCR引物,探讨应用上述引物进行RT-PCR检测SMAD基因在非小细胞肺癌中表达的可行性.方法 自主设计并验证 SMAD 基因家族 SMAD1 ～SMAD8 特异引物,确定SMAD1-1、SMAD2-1、SMAD3-1、SMAD4-2、SMAD5-1、SMAD6-1、SMAD7-1、SMAD8-2引物的扩增效率更高、特异性更强.采用RT-PCR技术检测SMAD1～SMAD8在人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B,肺腺癌细胞系A549、H1299,肺鳞癌细胞系SK-MES-1中的表达变化,引物为 SMAD1-1、 SMAD2-1、 SMAD3-1、 SMAD4-2、 SMAD5-1、 SMAD6-1、SMAD7-1、SMAD8-2.结果 以正常支气管上皮BEAS-2B细胞中SMAD1表达量为基准(校正RQ约为1),SMAD2相对表达量为6.590 ±0.459、SMAD3 为10.977 ±0.312、SMAD4 为4.651 ±0.115、SMAD5 为16.762 ±0.389、SMAD6为3.248 ±0.108、SMAD7为2.007 ±0.012、SMAD8为1.144 ±0.103,均较SMAD1表达升高,其中SMAD5表达最高,SMAD3次之. SMAD2、SMAD4、SMAD5、SMAD6、SMAD7、SMAD8 在肺腺癌A549、H1299 细胞及肺鳞癌SK-MES-1细胞中的表达均低于人正常支气管上皮BEAS-2B细胞;在H1299、SK-MES-1 细胞中SMAD1表达高于BEAS-2B和A549细胞,且在A549细胞中SMAD1表达低于BEAS-2B细胞;在SK-MES-1细胞中SMAD3表达升高,且在H1299、A549细胞中SMAD3表达较BEAS-2B细胞下降;在H1299细胞中SMAD2、SMAD6、SMAD7表较其他三种细胞均下降;各细胞间比较P＜0.05或＜0.01.结论 成功自主设计SMAD基因家族特异引物,并用于检测非小细胞肺癌中SMAD基因表达;SMAD5可能参与了肺癌的发生、发展,SMAD3可能与上皮相关性疾病相关.