分子改造提高谷氨酰胺转氨酶的催化活性

• 作者: 任蕊蕊 刘松 堵国成 李江华 陈坚
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 谷氨酰胺转氨酶 解脂耶氏酵母 定点突变 高效表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-14
• 页数: 6页
• 字数: 4292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.017153

摘要

谷氨酰胺转氨酶(EC2.3.2.13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶.为提高其催化活性,通过Discovery Studio 2017预测了Streptomyces mobaraense TGase中影响其与底物α-N-CBZ-GLN-GLY结合自由能的氨基酸位点,构建得到结合自由能下降的TGase突变体:Y24W、E300W和Y302R.与野生TGase相比,E300W的比酶活提高了31％;Km、kcat和kcat/Km值分别提高了10％、42％和29％,说明E300W比酶活的提高主要是由于酶转换数的增加.Y24W、E300W和Y302R的热稳定性均有不同程度下降.作用力分析发现,Y24W、E300W和Y302R主链-主链氢键分别减少1、2和4个.上述结果表明,基于蛋白质结合自由能分析的策略能迅速鉴定影响TGase催化活性关键氨基酸,进一步突变能有效提高其催化活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	堵国成	江南大学生物工程学院	339	3648	30.0	42.0
5	李江华	江南大学生物工程学院	78	362	10.0	15.0
9	刘松	江南大学生物工程学院	34	50	4.0	5.0
13	任蕊蕊	江南大学生物工程学院	2	2	1.0	1.0