丙泊酚诱导miR-378抑制大鼠肝脏缺血再灌注细胞凋亡的分子机制研究

• 作者: 姬翔 徐桂萍 李学斌 杨飞 苏涛 钮峥嵘
• 来源期刊: 疑难病杂志
• 关键词: 肝脏 缺血再灌注损伤 细胞凋亡 miR-378 丙泊酚 分子机制 大鼠
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 论著·基础
• 页码范围: 614-620
• 页数: 7页
• 字数: 5332字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6450.2018.06.018

摘要

目的 探讨丙泊酚诱导miR-378抑制细胞凋亡从而保护大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用机制.方法 于2017年3—6月在新疆医科大学动物实验中心完成实验.将健康成年SD大鼠45只按随机数字表法分为3组各15只:假手术组(sham组)、肝脏缺血再灌注损伤模型组(IR组)和丙泊酚处理的IR组(IR+propofol组).采用缺血60 min后再灌注120 min实施肝脏的缺血再灌注损伤.通过自动生化分析仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的水平以评价缺血再灌注的损伤程度.TUNEL方法检测3组大鼠的肝组织的细胞凋亡情况,Western blot和QPCR检测miR-378及凋亡相关因子的表达水平,采用人工合成miR-378 mimics,定点突变技术及双荧光素酶报告系统鉴定miR-378下游与凋亡相关的靶基因.结果 IR组的ALT、AST和LDH水平较sham组明显升高(t=17.236、16.527、14.349,P<0.01),IR+propofol组ALT、AST和LDH水平与IR组比较明显下降(t=15.626、14.995、11.376,P<0.01);与sham组相比,IR组的miR-378、Bcl-2和Bcl-xl表达明显降低(t=6.921、11.381、11.467,P<0.01),Cytochrome c、Bax、Bak、Caspase-9和Caspase-3的表达显著提高(t=14.486、12.653、11.434、15.712、15.934,P<0.01);丙泊酚处理的IR+propofol组逆转了此表达模式,使其与sham组趋于一致.TUNEL检测结果发现IR组的凋亡率远高于sham组(t=22.546,P=0.000),丙泊酚处理后,凋亡率降低(t=9.765,P=0.000).在人类正常肝细胞中,miR-378 mimics导致Bcl-2和Bcl-xl表达明显增加(t=15.589、15.715,P<0.01),而Cytochrome c、Bax、Bak、Caspase-9和Caspase-3表达显著下降(t=12.574、15.607、14.894、18.828、11.367,P<0.01),定点突变与双荧光素酶报告系统鉴定Bak及Caspase-3是miR-378的下游靶基因.结论 丙泊酚诱导miR-378表达,调节凋亡相关基因的表达,阻遏细胞凋亡信号的产生,从而发挥保护肝脏缺血再灌注损伤的作用,因此miR-378可作为肝脏缺血再灌注损伤治疗的新靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐桂萍	新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科	125	428	9.0	14.0
2	苏涛	新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科	22	34	4.0	4.0
3	杨飞	新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科	26	45	4.0	5.0
4	钮峥嵘	新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科	11	8	2.0	2.0
5	李学斌	新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科	11	23	3.0	4.0
6	姬翔	新疆维吾尔自治区人民医院麻醉科	1	0	0.0	0.0