无核荔枝ABA生物合成关键酶LcNCED基因克隆及其在生理落果阶段中的表达分析

• 作者: 吴凤芝 年宇薇 王祥和 胡福初 范鸿雁 陈业光 陈哲
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 荔枝 9-顺-环氧类胡萝卜素双加氧酶 基因克隆 基因表达 采前落果
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 300-307
• 页数: 8页
• 分类号: S435.33
• 字数: 6203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.02.014

摘要

9-顺-环氧类胡萝卜素双加氧酶(9-cis-epoxycarotenoids dioxygenase,NCED)是ABA生物合成途径的关键限速酶,本研究利用RT-PCR技术从A4无核荔枝中分离得到NCED的3条cDNA序列(命名为LcNCED1、LcNCED2和LcNCED3).通过同源比对和系统进化树分析,LcNCED基因编码的氨基酸序列与拟南芥等30个物种中的NCED氨基酸序列同源性都在65％以上,从而确定LcNCED属于NCED家族;通过与7条拟南芥及5条苹果NCED家族基因进行系统进化树分析,LcNCED2与调控苹果花瓣脱落MdNCED2、MdNCED4基因具有较高的同源性.Real-Time PCR表达分析发现,3个LcNCED基因在不同样品间表达存在显著差异,其中LcNCED2在各样品间的表达水平显著高于LcNCED1和LcNCED3,且LcNCED2表现出显著的组织特异性表达特点,花后15～75 d,LcNCED2在离区(果柄离层部位上下0.2 cm)中的表达量均高于种脐和果皮中,在花后45 d达到峰值,花后75 d稍有下降,基因表达的峰值略早于A4无核荔枝落果高峰期.而LcNCED1和LcNCED3在各组织样品中基因表达变化趋势规律不明显.上述结果表明,LcNCED2在离区中表达量变化比较符合A4无核荔枝生理落果趋势,推断LcNCED2基因可能与无核荔枝采前落果关系密切.