模拟失重对HaCaT细胞增殖及细胞骨架的影响

• 作者: 司少艳 周金莲 姜楠 孙宏伟 崔彦 张倍宁 徐冰心 林晶晶 闫洪峰
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 模拟微重力 微重力细胞培养系统 角质细胞 人永生化角质形成细胞 增殖 细胞周期 人肝素结合性表皮生长因子 细胞骨架
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1107-1111
• 页数: 5页
• 字数: 3492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2018.10.009

摘要

目的 研究模拟微重力环境对人永生化角质形成细胞(HaCaT)生长增殖及细胞骨架的影响.方法 应用RCCS建立模拟微重力细胞培养系统,将HaCaT细胞随机(随机数字法)分为模拟微重力组(SMG)和正常重力对照组(NG),经32 h、36 h和42 h培养后收集两组细胞,应用流式细胞仪技术检测细胞生长周期;ELISA检测细胞上清液hb-EGF浓度;激光共聚焦显微镜和荧光素FITC标记技术观察经42 h培养的两组HaCaT细胞骨架形态变化.采用SPSS 23.0统计学软件进行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 流式细胞仪检测结果显示,与NG组比较,SMG组HaCaT细胞经32 h、36 h和42 h培养,三个时相点的G1和G2/M期细胞数显著增加,S期细胞数显著减少(P<0.05).SMG组HaCaT细胞随培养时间延长,G1期细胞数呈减少趋势.ELISA结果显示,SMG组HaCaT细胞经32 h和36 h后hb-EGF浓度较NG组明显下降(P<0.01).激光共聚焦显微镜观察荧光素FITC标记的HaCaT细胞,发现模拟微重力培养42 h后,HaCaT细胞的荧光强度减弱,微丝排列紊乱,结构破坏明显,部分模糊不可见,细胞间伪足较少且不规则.结论 RCCS模拟微重力环境抑制HaCaT细胞周期转化和增殖,影响hb-EGF自分泌机能,并导致细胞骨架结构发生变化.