猪StAR基因启动子区克隆及其转录活性研究

• 作者: 侯胜奎 刘津 张伟峰 张婧 胡慧艳 贾青 锡建中
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: StAR基因 启动子 荧光素酶活性 报告基因
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1524-1532
• 页数: 9页
• 分类号: S828.2|Q785
• 字数: 4777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.07.023

摘要

旨在通过分析猪StAR基因启动子活性区域,探究猪StAR基因的转录调控机制,从育种学角度为提高猪繁殖力提供新思路.本研究根据Ensembl数据库已公布的猪StAR基因的5’侧翼区序列,利用在线预测软件对该基因启动子区序列信息进行分析,以大白猪基因组DNA为模板,利用特异性引物,进行PCR扩增、测序,进而构建启动子区不同缺失片段的pGL3-StAR双荧光素酶表达载体,转染293T细胞并进行活性检测.结果显示,StAR基因5’侧翼区不含有典型的TATA-box和CpG岛;成功克隆了10个含有不同长度的启动子片段,并构建了各片段与表达载体的重组质粒;转染293T细胞后经双荧光素酶活性检测发现,大白猪StAR基因5’侧翼区存在着核心启动子,其中-196～+127 bp这一区域活性值最高,且显著高于其他缺失片段(P＜0.01),表明在+127～-196 bp的区域内存在重要的正调控因素,外显子1对启动子活性起重要的调控作用.-41～-196 bp为核心启动子区域,该区域存在着关键的正调控元件,包含GATA2、GATA4、SP1、ZNF263、Hoxa9、KLF16和ZNF740转录因子结合位点.本试验通过对StAR基因进行生物信息学分析,并结合不同长度启动子片段双报告基因活性检测,证实了StAR基因的5’侧翼区序列具有启动子转录活性.初步确定了该基因的启动子区域,找到了启动子的核心区域和主要调控区域,为进一步研究StAR基因转录调控机制提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾青	河北农业大学动物科技学院	107	516	11.0	18.0
7	胡慧艳	河北农业大学动物科技学院	32	55	4.0	4.0
8	张婧	河北农业大学动物科技学院	12	6	1.0	2.0
12	张伟峰	河北工程大学生命科学与食品工程学院	12	40	4.0	6.0
13	刘津	河北农业大学动物科技学院	11	13	2.0	3.0
14	侯胜奎	河北农业大学动物科技学院	11	13	2.0	3.0