微小RNA-375调控自噬抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖和转移

• 作者: 宋虎 张建军 杜晨阳 沈中阳 王振 王星星
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 癌,肝细胞 自噬 微RNAs 细胞增殖 肿瘤转移
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 1267-1272,前插1
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20181137

摘要

目的 探讨微小RNA-375(miR-375)通过调控自噬相关蛋白(Atg)14介导的自噬对肝癌细胞(SMMC-7721)增殖和转移能力的影响.方法 将SMMC-7721细胞分别用miR-375模拟物、抑制物以及Atg14的干扰RNA处理,并建立缺氧1 h复氧6 h的模型,分为miR-375 NC组、miR-375 mimics组、miR-375 inhibitor组以及siRNA NC组、Atg14 siRNA组、miR-375+Atg14 siRNA组.TargetScan预测miR-375与Atg14基因相关性.荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-375 NC组、miR-375 mimics组、miR-375 inhibitor组miR-375、Atg14 mRNA相对表达量.免疫细胞化学染色检测3组细胞内N-钙黏素(N-Cadherin)和β-连环蛋白(β-catenin)表达分布情况.绿色荧光蛋白-红色荧光蛋白-轻链(mGFP-RFP-LC3)自噬双标腺病毒转染3组细胞,荧光显微镜下观察自噬体形成情况.平板克隆检测肝癌细胞增殖情况.Western blot检测Atg14、泛素结合蛋白(P62)、轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、酵母Atg6同源物(Beclin1)、N-Cadherin、β-catenin和波形蛋白(Vimentin)表达情况.结果 miR-375与Atg14基因相关性较高,qRT-PCR显示过表达miR-375能抑制Atg14 mRNA表达;反之能促进Atg14 mRNA表达.过表达miR-375能抑制肝癌细胞内N-Cadherin表达、提高β-catenin表达水平,抑制肝癌细胞增殖能力(P<0.01);而抑制miR-375表达能促进N-Cadherin表达、降低β-catenin表达水平,提高肝癌细胞增殖能力(P<0.01).过表达miR-375能抑制Atg14、LC3Ⅱ、Beclin1表达,促进P62表达(P<0.01);反之能促进Atg14、LC3Ⅱ、Beclin1表达,抑制P62表达(P<0.01).荧光显微镜下观察到过表达miR-375可抑制自噬体形成,而抑制miR-375表达能促进自噬体形成(P<0.01).干扰Atg14表达后可增强miR-375对肝癌细胞增殖、转移能力的抑制作用(P<0.01).结论 激活miR-375能抑制肝癌细胞增殖和转移,而抑制miR-375能促进肝癌细胞增殖和转移,其机制可能与miR-375通过靶向调控Atg14抑制自噬,从而抑制SMMC-7721肝癌细胞增殖和转移有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈中阳	天津市第一中心医院移植外科	365	1421	16.0	21.0
2	张建军	天津市第一中心医院移植外科	85	254	8.0	10.0
3	杜晨阳	天津医科大学一中心临床学院	11	25	4.0	4.0
4	宋虎	天津医科大学一中心临床学院	12	25	4.0	4.0
5	王星星	天津医科大学一中心临床学院	7	8	1.0	2.0
6	王振	天津市第一中心医院移植外科	19	29	3.0	4.0