镰刀菌Q7-31T金属蛋白酶FQME14的分离纯化及鉴定

• 作者: 卢玉丽 梁高丽 秦日甜 谢占玲 雷亚男
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 镰刀菌 金属蛋白酶 M14家族
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 161-167
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0896

摘要

从镰刀菌Q7-31T燕麦秸秆诱导发酵的粗酶液中分离、纯化并鉴定金属蛋白酶.研究该蛋白酶的酶学特性,丰富和完善金属蛋白酶的基础资料;探究其在纤维素酶系降解纤维素过程中发挥的作用,旨在丰富和完善纤维素酶系降解机制.以燕麦秸秆为碳源诱导发酵镰刀菌Q7-31T,并在发酵第6天收酶.通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-100凝胶过滤层析和DEAE弱阴离子交换层析对粗酶液进行分离纯化得到金属蛋白酶,随后对其进行了酶学性质分析和串联质谱鉴定.结果显示,从镰刀菌Q7-31T菌株的粗酶液中分离得到一种蛋白酶FQME14,其相对分子质量为30 kD;串联质谱鉴定的结果表明FQME14属于M14家族;蛋白酶酶学性质研究表明:该蛋白酶的比酶活为2.85 U/mg,最适反应pH和温度分别为pH 7.0和40℃,在pH 5.0-pH 9.0的范围内具有很好的稳定性,蛋白酶在50℃以下稳定性很好,超过50℃酶活力降低.该蛋白酶对酪蛋白、卵清蛋白和牛血清白蛋白都有很高的降解能力.金属离子Mn2+和Co2+对酶活性有激活作用,Mg2+、Cu2+、Fe2+、K+、Ca2+和Na+对酶活性有不同程度的抑制作用.从镰刀菌Q7-31T粗酶液中分离纯化得到蛋白酶FQME14,并对其进行了酶学性质的研究和串联质谱鉴定,结果表明FQME14为M14家族蛋白酶,是一种新的金属蛋白酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢占玲	青海大学生态环境工程学院微生物实验室	33	414	9.0	20.0
3	秦日甜	青海大学生态环境工程学院微生物实验室	3	2	1.0	1.0
4	卢玉丽	青海大学生态环境工程学院微生物实验室	2	1	1.0	1.0
5	梁高丽	青海大学生态环境工程学院微生物实验室	2	4	1.0	2.0