猪嗜淋巴疱疹病毒3型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 佟铁铸 刘中勇 刘星 周宇 朱事康 李春萍 林志雄 罗卓军 陈燕忠
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪嗜淋巴疱疹病毒3型 TaqMan 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 67-71
• 页数: 5页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3650字
• 语种: 中文

摘要

依据GenBank公布的猪嗜淋巴疱疹病毒3型(porcine lymphotropic herpesviruses 3,PLHV-3)DNA序列,设计特异性引物,优化反应条件,建立荧光定量PCR方法,并对方法的灵敏度、特异性和重复性进行试验.得出方法的线性范围为:8.2×101～8.2×107,灵敏度可达82个拷贝,方法的特异性高,只能检测pMD 18-T/PLHV3重组质粒,另外5种对照病原均未检出;方法的重复性好,对不同浓度的pMD18-T/PLHV3重组质粒分别扩增6次,结果重复性好.使用建立的方法检测100份临床样品,同时与普通PCR方法比较,显示荧光定量PCR检出率比普通PCR高,具有较高的灵敏度和准确性.结果表明:建立的荧光定量PCR可用于PLHV-3的临床快速诊断.