利用CRISPR/Cas9系统敲除绵羊皮肤成纤维细胞Wnt2基因的研究

• 作者: 冯新宇 冯瑞林 刘建斌 孙晓萍 岳耀敬 杨博辉 牛春娥 袁超 郭健 郭婷婷
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 无翅基因相关整合位点2 毛囊 CRISPR/Cas9 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 52-55
• 页数: 4页
• 分类号: S826
• 字数: 2843字
• 语种: 中文

摘要

为了研究无翅基因相关整合位点2 (Wnt2)在绵羊毛囊发育中的作用,通过CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术在绵羊原代皮肤成纤维细胞中敲除Wnt2基因,经T7E1酶切试验进行敲除结果验证,实时荧光定量PCR分析Wnt2、E-钙黏蛋白(CDH1)、半光天冬氨酸酶3(Caspase3)和成纤维细胞生长因子5(FGF5)在敲除后的表达量变化.结果显示:绵羊原代皮肤成纤维细胞中Wnt2基因敲除成功,编辑效率约14.35％;Wnt2相对表达量极显著下调(P＜0.01),CDH1相对表达量极显著上调(P＜0.01),Caspase3及FGF5表达上调显著(P＜0.05).结果表明:Wnt2基因对毛囊的生长发育具有促进作用.