原花青素通过自噬途径增强喉癌细胞对顺铂化疗敏感性的研究

• 作者: 于锋 刘炜 周毅波 林颖 龚小蓉
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原花青素 喉癌 自噬 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 论著——实验研究
• 页码范围: 447-451,456
• 页数: 6页
• 分类号: R739.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.13201/j.issn.1001-1781.2018.06.012

摘要

目的:探究原花青素(OPC)对喉癌TU686细胞自噬的影响,并从自噬和凋亡的角度讨论OPC增强喉癌细胞对顺铂(DDP)化疗敏感性.方法:CCK-8法检测不同浓度OPC和DDP对TU686细胞活力的影响;实验分组TU686细胞分为CON组、DDP组,OPC组、MIX组;Annexin-V-FITC/PI双染行流式细胞术检测各实验组对细胞凋亡的作用;细胞免疫荧光染色检测细胞自噬的形成;Western blot检测自噬及凋亡相关蛋白的表达;使用自噬抑制剂(3 MA)研究自噬对细胞凋亡的影响.结果:CCK-8结果显示OPC和DDP作用TU686细胞24 h后,都以浓度依赖性方式抑制TU686细胞增殖活力.LC3-Ⅱ蛋白染色观察到,与CON和DDP组、OPC组相比,MIX组作用TU686细胞后显著诱导自噬形成(P＜0.05).流式检测结果提示相比CON组,DDP组、OPC组和MIX组诱导TU686细胞凋亡,其中MIX组促凋亡作用明显高于OPC组和DDP组(P＜0.05),使用3-MA预处理后,OPC组及MIX组对喉癌细胞的凋亡作用显著下降(P＜0.05).Western blot的结果提示DDP、OPC及MIX组的LC3-Ⅱ与Caspase-3蛋白的表达明显高于CON组(P＜0.05),而其中MIX组较之于单药组,其LC3-Ⅱ与Caspase-3表达的增加亦差异有统计学意义(P＜0.05).使用3-MA抑制自噬后,LC3-Ⅱ的表达显著下降(P＜0.05),Caspase-3的表达伴随LC3-Ⅱ发生降低,但Caspase-3表达的下降只在OPC及MIX组具有显著意义(P＜0.05).结论:OPC可以通过诱导喉癌TU686细胞自噬,促进其凋亡,进而增强喉癌细胞对顺铂化疗敏感性.