MDS铁过载小鼠模型建立及鉴定

• 作者: 卢文艺 孟娟霞 崔蕊 徐萍 曹小立 王露桥 赵明峰 邢艺 金鑫 隋松男
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MDS 铁过载动物模型 RUNX1基因 骨髓移植
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 骨髓增殖性疾病
• 页码范围: 1129-1136
• 页数: 8页
• 分类号: R551.3
• 字数: 5137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7534/j.issn.1009-2137.2018.04.031

摘要

目的:建立一种MDS铁过载小鼠模型,研究铁过载对MDS的影响.方法:通过逆转录病毒,将外源突变基因RUNX1-S291fs插入小鼠骨髓单个核细胞基因组,然后移植给经60Co γ射线照射的C57 BL/6小鼠.8周后,腹腔注射铁剂,建立MDS铁过载小鼠模型.移植24周后,取小鼠外周血、骨髓、股骨、肝脏和脾脏进行鉴定:对外周血和骨髓细胞行瑞氏染色观察形态特征;对股骨、肝脏和脾脏组织行HE染色检测病理变化;对肝脏、脾脏和骨髓行普鲁士蓝染色观察铁沉积情况;应用流式细胞术检测小鼠骨髓细胞抗原表达情况;对骨髓单个核细胞和脾组织蛋白行免疫印迹实验,确认RUNX1-S291fs基因转入并表达蛋白.移植后对小鼠定期监测血常规指标和移植细胞嵌合率.结果:相比空白质粒对照小鼠,RUNX1-S291fs突变小鼠外周血白细胞计数、血红蛋白水平和血小板计数均降低;外周血和骨髓细胞显示病态造血;肝脏和脾脏明显增大;在股骨、肝脏和脾脏可见组织结构异常;骨髓细胞表面抗原表达异常;骨髓细胞和脾组织有RUNX1-S291 fs蛋白表达.相比生理盐水对照小鼠,铁剂注射小鼠普鲁士蓝染色可见骨髓、肝脏和脾脏组织有明显铁沉积.结论:注射铁剂的RUNX1-S291fs突变组小鼠合并有MDS和铁过载的病理特征,成功构建了MDS铁过载小鼠模型,为研究铁过载对MDS的影响奠定了基础.