猪肺炎支原体HN0613株高密度发酵工艺研究及效力评价

• 作者: 刘鹏 张翼 朱巧燕 李向东 李鹏昊 田克恭 黄玉欣
• 来源期刊: 畜牧与饲料科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体HN0613株 培养滴度 高密度发酵 免疫效力
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 10-15,23
• 页数: 7页
• 分类号: S858.282.62|TQ460
• 字数: 5214字
• 语种: 中文

摘要

旨在建立猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)HN0613株高密度发酵工艺技术.以培养滴度(CCU)作为考查指标,确定Mhp HN0613株的最佳活力代次以及复苏培养时间;通过四因素三水平正交试验筛选最佳基础培养基配方;以通气量、搅拌转速和接种百分比作为单因素考查指标,优化15 L发酵工艺参变量,并确定700 L高密度发酵放大工艺;按照确定的高密度发酵工艺技术,制备Mhp HN0613株灭活疫苗,评价其对兔和仔猪的免疫效力.结果表明,Mhp HN0613株F11代较其他代次CCU水平高,可达1×109 CCU/mL,为最佳活力代次;其在复苏72 h后,pH值降为7.0左右,CCU水平达到最高,为1×109 CCU/mL,为最佳复苏培养时间;培养体系中,2％的初始葡萄糖添加量、8％接种百分比、初始培养基pH值7.6、15％猪血清添加量为最适培养条件;通气量100 L/h、搅拌转速300 r/min和8％接种百分比条件最有利于Mhp HN0613株15 L发酵培养;首次建立了平衡kLa联动pH值回调的工艺技术路线,并将优化后发酵罐搅拌叶轮结构改为推进式叶轮,降低了叶轮对菌体的剪切作用力,CCU较优化前提高了10倍,且培养周期较优化前缩短了2～3 d;700 L高密度发酵放大工艺中,Mhp HN0613株培养滴度不低于5×109 CCU/mL,最高可达1×1010 CCU/mL;免疫兔血清抗体效价均不低于1:40,最高可达1:160;免疫组实验仔猪肺炎减少率均高于80％,临床观察精神及食欲未见异常.该研究为Mhp疫苗规模化发酵生产提供了一定的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李向东		13	4	2.0	2.0
2	田克恭		27	27	2.0	5.0
3	张翼		2	2	1.0	1.0
4	刘鹏		3	2	1.0	1.0
5	黄玉欣		3	2	1.0	1.0
6	李鹏昊		3	2	1.0	1.0
7	朱巧燕		2	2	1.0	1.0