基于反转录环介导等温扩增技术检测大肠杆菌O157

• 作者: 刘秀 周振森 周鹏飞 尹建军 梁玉林
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 反转录-环介导等温扩增 大肠杆菌O157 检测 脱脂乳
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 59-65
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0932

摘要

建立反转录环介导等温扩增(Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification RT-LAMP)方法特异性检测大肠杆菌O157.针对大肠杆菌O157的特异性保守rfbE基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测大肠杆菌O157的实时荧光RT-LAMP方法.利用大肠杆菌O157及其人工污染脱脂乳样品,研究了方法的特异性和灵敏度,并与rRT-PCR(Real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction)方法的灵敏度进行比较.结果显示,等温65℃条件下,30 min内能完成RT-LAMP扩增反应.所建立的实时荧光RT-LAMP方法特异性强,除了2株大肠杆菌O157以外其余菌株均未产生特异性扩增反应.同时该方法灵敏度高,对人工污染脱脂乳样品检测灵敏度能达到20 CFU/g,比rRT-PCR方法高10倍.建立的实时荧光RT-LAMP方法将为大肠杆菌O157现场快速检测提供有力手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹建军		45	298	10.0	15.0
2	梁玉林		6	10	2.0	3.0
3	刘秀		13	36	3.0	5.0
4	周振森		5	10	2.0	3.0
5	周鹏飞		4	10	2.0	3.0