抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌抗菌肽基因筛选及表达鉴定

• 作者: 于寒松 任大勇 刘宏妍 朱剑威
• 来源期刊: 食品与机械
• 关键词: 乳酸菌 抗菌肽 pET28a 金黄色葡萄球菌
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 字数: 3365字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13652/j.issn.1003-5788.2018.09.001

摘要

以具有抑菌效果的L2、L16、L19等7株乳酸菌为模板,通过PCR扩增验证部分菌株中含有PlnF、PlnE、PlnN、PlnJ、PlnK等抗菌肽基因,以pET28a为载体并在抗菌肽基因两端引入Nco I和Xho I酶切位点,经双酶切和T4连接酶反应构建pET28a-抗菌肽重组质粒,转化E.coli BL21(DE3),培养至OD600=0.6时,加入0.5 mmol/L的IPTG诱导6 h,菌体在400 W、超声4 s、间歇5 s条件下破碎后以8 mol/L尿素进行变性处理和Ni柱纯化透析复性后的蛋白与相对应未纯化的蛋白相比,仅PlnF纯化蛋白对金黄色葡萄球菌具有抑菌效果[抑菌圈直径为(13.43±0.21)mm],而其他蛋白几乎无抑菌活性.进一步通过Tricine-SDS-PAGE电泳和nanoLC-ESI-MS/MS验证,目的蛋白与PlnF抗菌肽具有97.6％的同源性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于寒松	吉林农业大学食品科学与工程学院	89	334	9.0	14.0
2	任大勇	吉林农业大学食品科学与工程学院	47	206	6.0	13.0
3	刘宏妍	吉林农业大学中药材学院	18	39	4.0	5.0
4	朱剑威	吉林农业大学食品科学与工程学院	6	19	3.0	4.0