探讨靶向调控蛋白激酶D1的微小RNA及其对大鼠急性胰腺炎的影响

• 作者: 何李英 叶丽萍 徐佳佳 杨敏 王洪丽 程旸 耿岚岚 许万福 许朝晖 陈佩瑜 陈涣 龚四堂
• 来源期刊: 中华实用儿科临床杂志
• 关键词: 急性胰腺炎 miR-128-3p 蛋白激酶D1 坏死
• 年，卷（期）: 2018,（19）
• 所属期刊栏目: 消化营养性疾病
• 页码范围: 1473-1477
• 页数: 5页
• 字数: 3754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-428X.2018.19.006

摘要

目的 预测和印证调控蛋白激酶D1(PKD1)的微小RNA(miRNA),探讨其在蛙皮素诱导的大鼠急性胰腺炎(AP)中发挥的作用.方法 生物信息学软件预测PKD1的上游调控miRNA,并通过双荧光素酶报告基因和Western blot验证目标miRNA对PKD1表达的调控.采用蛙皮素(20μg/kg)腹腔注射(每隔1 h注射1次,连续6次)的方法构建AP模型.大鼠分为正常组(10只)、AP组(20只)和治疗组(20只),其中,正常组不做处理,AP组和治疗组分别在造模前腹腔注射对照miRNA和带CY5荧光基因的miRNA模拟体.AP组和治疗组各取10只在首次注射蛙皮素后6 h处死,其余在首次注射后24 h处死.所有动物下腔静脉采血检测血清淀粉酶、脂肪酶活力;采集胰腺组织包埋切片行免疫组织化学染色检测PKD1的表达,HE染色进行AP病理评分.结果 TargetSacn7.1软件预测miR-128-3p为PKD1潜在的调控miRNA,双荧光素酶报告基因和Western blot证实miR-128-3p与PRKD1 mRNA 3′UTR结合,抑制PKD1的蛋白表达.造模后6 h,AP组与治疗组血清淀粉酶和脂肪酶活力较正常组增高[13313.00(9424.00～15995.00)U/L、13552.00(10399.50～18408.25)U/L比1430.50(1214.25～1543.25)U/L;547.00(515.00～627.00)U/L、857.50(522.00～1222.25)U/L比34.00(32.50～34.75)U/L],差异均有统计学意义(χ2=8.715,P<0.05;χ2=9.115,P<0.05),提示造模成功.造模后24 h,治疗组PKD1免疫组织化学评分[0.50(0～2.75)分]较正常组[4.00(4.00～8.00)分]和AP组[4.00(3.75～8.00)分]均下降,差异有统计学意义(χ2=18.302,P<0.05).炎性细胞浸润和组织坏死明显好转,病理评分总分显著低于AP组(3.80±0.85比6.90±1.15,t=4.481,P<0.01).结论 miR-128-3p是PKD1的上游调控miRNA,可抑制PKD1介导的AP大鼠的组织坏死和炎性细胞浸润.