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摘要:
目的 构建人FAM172A干扰慢病毒表达载体,并包装成FAM172A干扰慢病毒感染甲状腺乳头状癌细胞予以鉴定.方法 根据人FAM172A mRNA序列设计退火Oligo,与慢病毒载体pL/shRNA/F经酶切、连接、转化、测序鉴定.病毒包装后,转染HEK293细胞测定病毒滴度.将重组慢病毒感染甲状腺乳头状癌细胞,利用荧光显微镜和QPCR检测FAM172A的表达.结果 重组慢病毒载体pL/shRNA/F-shFAM172A经PCR扩增及测序鉴定正确,病毒包装后荧光显微镜观察到FT293细胞中有大量绿色荧光,测定病毒滴度为5×106TU/ml.FAM172A干扰慢病毒感染的甲状腺乳头状癌细胞中FAM172A表达被显著减少.结论 成功制备了人重组FAM172A干扰慢病毒,并在甲状腺乳头状癌细胞中高效减少FAM172A的表达,为进行FAM172A的功能和机制奠定了良好的基础.
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文献信息
篇名 人FAM172A干扰慢病毒载体的构建及在甲状腺乳头状癌细胞中的表达
来源期刊 医学研究杂志 学科 医学
关键词 FAM172A 载体构建 慢病毒 甲状腺乳头状癌细胞
年,卷(期) 2018,(12) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 41-45
页数 5页 分类号 R3
字数 3399字 语种 中文
DOI 10.11969/j.issn.1673-548X.2018.12.011
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李婷婷 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科 31 81 5.0 8.0
2 封启明 上海交通大学附属第六人民医院急诊科 72 367 9.0 15.0
3 李连喜 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科 25 75 5.0 8.0
4 李梅芳 上海交通大学附属第六人民医院急诊科 11 119 4.0 10.0
5 陈明云 上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科 5 2 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
FAM172A
载体构建
慢病毒
甲状腺乳头状癌细胞
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2-590
1972
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