半夏药材炮制品DNA提取方法的优化及分子鉴定

• 作者: 张婉君 林书明 段永波 苏勇 薛建平 赵丰兰 马青青
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 炮制半夏药材 DNA提取 甲醇沉淀 ITS2序列 分子鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 加工炮制与养护
• 页码范围: 1585-1588
• 页数: 4页
• 分类号: R282.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2018.07.014

摘要

目的:优化炮制半夏基因组DNA提取方法并进行市售炮制药材的分子鉴定.方法:以半夏药材炮制品为试验材料,对CTAB水浴后沉淀试剂进行筛选,并优化样品用量、沉淀试剂和裂解时间3个参数,建立半夏炮制品DNA提取方法;采用该法提取市售13份姜半夏和法半夏基因组DNA,用基于ITS2序列的PCR扩增法进行分子鉴定.结果:以CTAB水浴后加入甲醇处理可有效促进DNA沉淀,起始半夏药材0.5g、水浴裂解时间1h即可快速高效获得基因组DNA.对所提取DNA样品进行PCR扩增,所有样品全部成功测序.相似性搜索法分析表明,13份样品中10份为掌叶半夏,3份为半夏.结论:该研究建立了简易快速的半夏药材炮制品DNA提取技术,所提DNA满足半夏药材的分子鉴定要求.该结果也提示市售半夏药材混伪情况较多,值得重视.