siRNA技术沉默SOCS3对缺氧复氧心肌细胞增殖、凋亡的影响以及作用机制

• 作者: 卜秀梅 张晓璐 杜建峰 王文刚 王静
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 缺血再灌注损伤 心肌细胞 SOCS3 NF-κB
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1360-1365
• 页数: 6页
• 分类号: R543.3
• 字数: 4853字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2018.09.016

摘要

目的:研究小干扰RNA(siRNA)靶向沉默细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)基因对心肌细胞增殖、凋亡的影响以及可能作用机制.方法:采用脂质体Lipofectamine 2000转染大鼠H9C2心肌细胞,分为对照组、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+siRNA NC组、缺氧/复氧+siRNA SOCS3组;免疫印迹试验(Western blot)检测细胞的转染效果;噻唑蓝(MTT)观察细胞的增殖活性,观察细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的变化;膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)染色法检测细胞凋亡率,Western blot检测核因子-κB(NF-κB)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、c-Myc蛋白水平.结果:与对照组相比,缺氧/复氧组心肌细胞SOCS3蛋白水平显著增加(P<0.05),细胞的增殖活性、SOD显著下降(P<0.05),LDH、MDA、凋亡率显著升高(P<0.05);靶向沉默缺氧复氧心肌细胞SOCS3基因表达较缺氧/复氧组细胞的增殖活性和SOD显著增加(P<0.05),LDH、MDA、凋亡率显著降低(P<0.05);缺氧/复氧干预心肌细胞显著抑制NF-κB、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达(P<0.05),下调SOCS3基因表达显著增加NF-κB、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达(P<0.05).结论:沉默SOCS3表达促进缺氧复氧心肌细胞增殖,抑制其凋亡,增强机体氧自由基的清除能力,其作用机制与NF-κB信号通路的激活有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王文刚		14	82	4.0	9.0
2	张晓璐		8	11	3.0	3.0
3	王静		7	13	3.0	3.0
4	卜秀梅		2	4	1.0	2.0
5	杜建峰		1	3	1.0	1.0