瑶药厚叶南五味子逆转肝纤维化活性部位的体外筛选及化学成分研究

• 作者: 刘瑛 吕纪华 柴玲 王丽 陆国寿
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 厚叶南五味子 石油醚部位 肝纤维化 化学成分
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 1990-1994
• 页数: 5页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2018.08.046

摘要

目的:体外筛选出厚叶南五味子逆转肝纤维化作用的最佳活性部位,并对其化学成分进行解析.方法:厚叶南五味子经天然药物化学方法提取得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水层共4个部位,采用CCK-8法检测不同溶剂提取物对大鼠肝星状细胞HSC-T6的增殖作用、ELISA法检测不同溶剂提取物对细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)成分的影响,从中筛选出逆转肝纤维化活性最佳的部位.Western blot检测最佳活性部位处理细胞后磷酸化c-jun氨基端激酶(P-JNK)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(P-p38)的含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;采用气相-质谱(GC-MS)方法对该活性部位进行解析.结果:厚叶南五味子石油醚部位对HSC-T6细胞的增殖抑制作用最强,IC50为35.73 μg/mL;进一步筛选显示石油醚部位可显著降低细胞外基质成分Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的表达;厚叶南五味子石油醚部位作用后,HSC-T6细胞磷酸化JNK、p38蛋白表达较空白对照组显著降低(P＜0.01),细胞凋亡率显著升高(P＜0.05);从厚叶南五味子石油醚部位中分离出27个成分,并鉴定出其中20个成分,主要成分为石竹烯(25.329％)、δ-杜松烯(13.211％)和β-石竹烯(10.076％).结论:厚叶南五味子石油醚部位具有较好的逆转肝纤维化活性,其作用机制与抑制磷酸化JNK、p38表达及诱导细胞凋亡有关,石竹烯、δ-杜松烯及β-石竹烯可能是其发挥逆转肝纤维化作用的物质基础.