大鼠冠蛋白6在大肠杆菌中的表达、纯化与复性

• 作者: 于洁 张赭 朱静 李菲菲 王中山 许政
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: 冠蛋白6 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R394
• 语种: 中文
• DOI: 10.19460/j.cnki.0253-3685.2018.01.001

摘要

目的 利用大肠杆菌表达体系制备冠蛋白6 (Coronin 6),探讨其表达、纯化和复性的条件与方法.方法 构建Coronin 6基因过表达载体,转化大肠杆菌BL21 (DE3)进行诱导表达,对纯化得到的蛋白质进行复性,利用镍亲和层析柱和分子筛层析柱进行纯化,SDS-PAGE检测蛋白质表达和复性情况.结果 成功构建Coronin 6过表达载体;Coronin 6在大肠杆菌BL21 (DE3)中能够大量表达,表达条件为37℃、异丙基-β-D硫代半乳糖苷0.1 mmol/L诱导6h,Coronin 6以包涵体的形成存在.SDS-PAGE分析表明,Coronin 6蛋白质能够充分溶解于8mol/L的尿素中,其分子量为52.9 kDa.对Coronin 6进行纯化和复性,获得较高纯度(＞90％)的Coronin 6活性蛋白质,经纯化后能稳定存在于凝胶层析缓冲液中,每升LB培养基可获得纯度较高的蛋白质2.1 mg.结论 获得纯度较高的Coronin 6活性蛋白质,克隆并建立Coronin 6蛋白在大肠杆菌中表达、纯化和复性的条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张赭	徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室	3	0	0.0	0.0
2	王中山	徐州医科大学江苏省麻醉学重点实验室	6	3	1.0	1.0
3	朱静	徐州医科大学麻醉学院	1	0	0.0	0.0
4	许政	徐州医科大学麻醉学院	2	5	1.0	2.0
5	李菲菲	徐州医科大学麻醉学院	2	0	0.0	0.0
6	于洁	徐州医科大学麻醉学院	1	0	0.0	0.0