固定时间不同的大鼠视网膜血管铺片酶消化技术改进研究

• 作者: 刘建轲 李永胜 李玉明 王现轩 田蒙鸽 苏衍萍 赵博厚
• 来源期刊: 泰山医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜血管铺片 固定时间 酶联合消化技术
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 经验交流
• 页码范围: 1267-1269
• 页数: 3页
• 分类号: R-33
• 字数: 2991字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7115.2018.11.020

摘要

目的 探索固定时间不同的大鼠视网膜铺片酶消化方法和消化时间,提高大鼠视网膜铺片质量.方法 正常SD大鼠12只,颈椎脱臼法处死后,摘取眼球,随机分3组于4%甲醛溶液中固定2天、3个月及7个月.将固定好的眼球取出,分离视网膜,每例视网膜再随机分为2份,分别行常规胰蛋白酶消化和改进后的蛋白酶K-胰蛋白酶联合消化.消化完全后制备视网膜血管铺片,HE染色,显微镜下观察各级血管形态,直到获得清晰的血管图像为止.结果 固定2天、3个月及7个月的大鼠视网膜常规胰蛋白酶消化法所用时间分别为:3%的胰酶消化液10 h、6%的胰酶消化液22 h、9%的胰酶消化液28 h.蛋白酶K-胰蛋白酶联合消化法所用时间分别为:0.1%的蛋白酶K消化15 min,3%胰蛋白酶消化5 h;0.1%的蛋白酶K消化15 min,6%胰蛋白酶消化7 h;0.1%的蛋白酶K消化20 min,9%胰蛋白酶消化20 h.固定2天、3个月的视网膜在两种消化方法中,成片效果基本相同,血管网铺片完整,各级血管形态、走向清晰,无断裂,血管内皮细胞形态及细胞核均清晰显示,但联合消化法消化的更为彻底几乎无其他组织残留.固定7个月的视网膜,采用单纯胰蛋白酶消化的,存在血管断裂现象,而采用联合消化法的视网膜血管断裂现象优于前者.结论 改进后的蛋白酶K-胰蛋白酶联合消化法,优于常规胰蛋白酶消化法,对长时间固定的视网膜消化稳定性较好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏衍萍		54	174	8.0	9.0
2	赵博厚		3	2	1.0	1.0
3	李永胜		10	29	3.0	5.0
4	李玉明		1	1	1.0	1.0
5	王现轩		1	1	1.0	1.0
6	田蒙鸽		1	1	1.0	1.0
7	刘建轲		1	1	1.0	1.0