多重PCR方法快速检测血流感染10种常见病原菌方法的建立与应用

• 作者: 何赏 张可昕 曲芬 王成彬 罗燕萍 胡翀 陈琛 马薇
• 来源期刊: 中华医院感染学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多重聚合酶链式反应 细菌鉴定 快速检测
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 961-965,978
• 页数: 6页
• 分类号: R440
• 字数: 3854字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11816/cn.ni.2017-172351

摘要

目的 应用多重聚合酶链式反应(PCR)技术,建立肺炎克雷伯菌 、鲍氏不动杆菌 、肺炎链球菌 、屎肠球菌 、粪肠球菌 、大肠埃希菌 、表皮葡萄球菌 、金黄色葡萄球菌 、铜绿假单胞菌 、奇异变形杆菌等临床常见病原菌的快速 、高效检测方法 ,并应用于血培养后病原菌的检测.方法以肺炎克雷伯菌khe基因 、鲍氏不动杆菌OXA基因 、肺炎链球菌L ytA基因 、屎肠球菌和粪肠球菌ddl基因 、大肠埃希菌phoA基因 、表皮葡萄球菌2312基因 、金黄色葡萄球菌nuc基因 、铜绿假单胞菌ec f X基因 、奇异变形杆菌ure基因序列为模板,分别设计特异性引物,建立多重PCR扩增体系并优化.收集临床血培养报阳标本200份,应用所建立的多重PCR法鉴定,并与传统血培养方法比较.结果 多重PCR法可特异性扩增出10种病原菌目标DNA条带,200份报阳样本目标菌阳性预测值为60.5％,除传统血培养有1份漏检外,多重PCR与血培养法结果符合率为100％.结论 多重PCR方法与传统鉴定方法相比,可大幅度缩短临床培养报阳后鉴定时间,其多种病原菌同时检测的优势,具有良好的临床应用前景.