茶树尿苷二磷酸-葡萄糖-脱氢酶基因的克隆及其表达分析

• 作者: 叶乃兴 孙云 林浥 王鹏杰 郑玉成 郑知临 陈笛
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 茶树 尿苷二磷酸-葡萄糖-脱氢酶 基因克隆 多糖含量 表达分析
• 年，卷（期）: 2018,（23）
• 页码范围: 5640-5648
• 页数: 9页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2018.23.025

摘要

目的 对参与多糖合成途径的茶树尿苷二磷酸-葡萄糖-脱氢酶基因(Camellia sinensis UDP-glucose-dehydrogenase gene,CsUGD)进行克隆、生物信息学分析、组织表达特异性分析及测定茶树不同器官组织多糖含量.方法 通过转录组数据获得茶树同源基因序列.利用ProtParam、TMpred、signalP、NetPhos、SMART、SSPro 4.0等在线软件进行生物信息学分析.VMD 编辑CsUGD 基因蛋白质三维结构;Jalview 软件进行多序列比对;MEGA5.0构建系统进化树.采用qRT-PCR对不同器官组织进行基因表达差异分析,通过蒽酮硫酸比色法测定不同器官的多糖含量.结果 获得茶树CsUGD 基因(MG366591)全长cDNA 序列,该序列全长1 866 bp,编码480个氨基酸.CsUDP 蛋白属于稳定亲水蛋白,不含信号肽,具有跨膜结构,并与柿树亲缘关系最近.荧光定量PCR 显示,CsUGD 在茶树的侧根中表达量最高;蒽酮硫酸比色法测定显示,在侧根中多糖含量最高.结论 首次从茶树中克隆出CsUGD 基因,阐明该基因在茶树生长发育中的重要作用,在茶树多糖合成途径中起到关键作用,为茶树育种并提高茶叶药用价值提供科学依据.