地黄糖基转移酶基因克隆表达及表达分析

• 作者: 朱畇昊 李璐 董诚明 赵乐
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 基因克隆 原核表达 荧光定量 糖基转移酶
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 资源与鉴别
• 页码范围: 1297-1301
• 页数: 5页
• 分类号: R282.71
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2018.06.010

摘要

目的:从地黄中克隆尿苷二磷酸糖基转移酶(uridine diphosphate glycosyhransferase,UGT)基因,构建其原核表达体系,为后续分析验证其功能奠定基础.方法:在转录组测序的基础上,通过RT-PCR克隆全长cDNA序列.运用生物信息学的方法对该序列进行分析.通过荧光定量PCR检测该基因在不同品种地黄不同部位中的表达情况.构建重组表达载体pET-32a-RgUGT,并转化大肠杆菌BL21,获得重组蛋白.结果:克隆得到RgUGT基因长度为1 374 bp,编码457个氨基酸,RgUGT基因具有尿嘧啶二磷酸-糖基转移酶PSPG盒子,荧光定量PCR结果显示RgUGT基因在根和叶中的表达水平较高.该基因成功在大肠杆菌BL21细胞中表达.结论:该研究从地黄中克隆获得了糖基转移酶基因,可为进一步研究其在地黄次生代谢生物合成中的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董诚明		140	944	15.0	24.0
3	赵乐		45	96	6.0	8.0
7	朱畇昊		21	44	4.0	5.0
9	李璐		25	72	5.0	7.0