抑制高迁移率族蛋白1减轻大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后的损伤

• 作者: 吕聪 孙麟 宋君来 李满 贺亚军 马迅
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓损伤 星形胶质细胞 HMGB1 细胞损伤 氧糖剥夺/复氧 干扰 丙酮酸乙酯 MTT LDH
• 年，卷（期）: 2018,（28）
• 所属期刊栏目: 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 4537-4543
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 7586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.0836

摘要

背景:既往对于抑制大鼠体内高迁移率族蛋白1(high mobility group protein,HMGB1)的释放改善脊髓功能的恢复较多,但对于体外培养脊髓星形胶质细胞,抑制HMGB1改善细胞氧糖剥夺/复氧的损伤研究尚少.目的:探讨抑制大鼠脊髓星形胶质细胞HMGB1后减轻细胞氧糖剥夺/复氧的损伤作用.方法:星形胶质细胞从新生SD大鼠脊髓提取,分离,培养鉴定.实验分两部分:第一部分实验,体外培养大鼠脊髓原代星形胶质细胞,对细胞行氧糖剥夺/复氧处理,实验分组:对照组,正常培养;氧糖剥夺6 h/复氧6,12,24 h组.第二部分实验,星形胶质细胞分组:对照组,正常培养;氧糖剥夺6 h/复氧24 h组;特异性RNA干扰组;非特异性RNA干扰组;丙酮酸乙酯组.利用Western blot和ELISA法检测各部分实验各组星形胶质细胞HMGB1的表达和释放量,利用乳酸脱氢酶的漏出率和MTT法检测细胞的损伤和存活率,光镜下观察细胞损伤后细胞形态结构的变化.结果与结论:①脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后,HMGB1蛋白表达及分泌升高(P<0.01),且复氧至24 h时达到最高值(P<0.01);特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组HMGB1的表达量明显降低,提示特异的HMGB1 shRNA和丙酮酸乙酯能有效抑制HMGB1表达;②细胞氧糖剥夺/复氧后,乳酸脱氢酶漏出率均明显增加,细胞存活率降低(P<0.01),复氧至24 h时损伤最为严重(P<0.01).与氧糖剥夺6 h/复氧24 h组相比,特异性RNA干扰组及丙酮酸乙酯组细胞的乳酸脱氢酶漏出率明显下降;③光镜下观察细胞在氧糖剥夺/复氧后,细胞出现肿胀,分解等损伤变化,而特异RNA干扰和丙酮酸乙酯组细胞损伤明显减轻;④结果提示,HMGB1在脊髓星形胶质细胞损伤发生与发展中起到关键性的作用,且抑制HMGB1后能减轻氧糖剥夺/复氧对大鼠脊髓星形胶质细胞的损伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马迅	山西医科大学附属大医院骨科	111	600	12.0	20.0
2	李满	山西医科大学第二医院神经内科	11	30	3.0	5.0
3	孙麟	山西医科大学附属大医院骨科	9	24	3.0	4.0
4	宋君来	山西医科大学附属大医院骨科	2	2	1.0	1.0
5	吕聪	山西医科大学附属大医院骨科	5	9	2.0	2.0
6	贺亚军	山西医科大学附属大医院骨科	3	5	2.0	2.0