小米抗氧化肽的纯化及其抑制H2O2诱导损伤的胰岛素瘤细胞氧化应激作用

• 作者: 刘剑利 曹向宇 王帅 田思琪 贺音 阎笑 霍雅鹏
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 小米抗氧化肽 氧化应激 胰岛细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（19）
• 所属期刊栏目: 营养卫生
• 页码范围: 169-174
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.2
• 字数: 4898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201819026

摘要

本研究利用Sephadex G-25和DEAE-32对小米抗氧化肽进行纯化,利用醋酸纤维素薄膜电泳法测定小米抗氧化肽的纯度,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基清除实验考察纯化的小米抗氧化肽对自由基的清除能力.在细胞水平研究小米抗氧化肽对胰岛细胞的保护作用,利用H2O2进行大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)氧化应激造模,采用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygenspecies,ROS)水平,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法检测细胞活力,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测抗氧化酶的表达水平.结果表明:经过Sephadex G-25和DEAE-32两次层析,小米抗氧化肽达到了电泳纯;50μg/mL小米抗氧化肽对超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为(62.71±3.86)％、(73.56±4.51)％和(82.62±5.25)％;小米抗氧化肽能显著提升H2O2损伤后细胞活力,降低细胞内ROS水平,抑制H2O2诱导损伤的INS-1细胞的凋亡(P<0.05),其可能的机制与超氧化物歧化酶1、过氧化氢酶、谷胱甘肽巯基转移酶、醌氧化还原酶1等抗氧化酶系的表达上调有关.结论:小米抗氧化肽对H2O2诱导损伤的INS-1细胞氧化应激具有一定的保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王帅	辽宁大学生命科学院	19	40	4.0	5.0
2	曹向宇	辽宁大学生命科学院	43	403	11.0	17.0
3	刘剑利	辽宁大学生命科学院	32	223	10.0	12.0
4	贺音	辽宁大学生命科学院	2	8	2.0	2.0
5	霍雅鹏	辽宁大学生命科学院	16	112	7.0	9.0
6	阎笑	辽宁大学生命科学院	1	4	1.0	1.0
7	田思琪	辽宁大学生命科学院	1	4	1.0	1.0