TET1过表达载体构建及其稳定过表达的宫颈癌HeLa细胞鉴定

• 作者: 丁妍 徐殿琴 沈凤 沈艳 谭玉洁 闫海洋
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 Hela细胞 甲基胞嘧啶双加氧酶1 载体构建 脂质体转染
• 年，卷（期）: 2018,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 43-45
• 页数: 3页
• 分类号: R373.33
• 字数: 3405字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2018.16.012

摘要

目的 构建甲基胞嘧啶双加氧酶1(TET1)过表达载体并对其稳定过表达的宫颈癌HeLa细胞进行鉴定.方法 从人宫颈癌组织中扩增出 TET1目的片段并将其克隆到 pLVX-MYRF 载体上,构建真核表达载体pLVX-MYRF-TET1,进行双酶切及测序验证.选择宫颈癌HeLa细胞,随机分为TET1组、阴性对照组,采用脂质体转染法分别转染重组质粒pLVX-MYRF-TET1、空质粒pLVX-MYRF,采用Real-time PCR法和Western blotting法检测两组TET1 mRNA和蛋白表达.结果 经双酶切分析及测序验证,成功构建了真核表达载体pLVX-MYRF-TET1.与阴性对照组比较,TET1组TET1 mRNA和蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05).结论 成功构建TET1过表达载体pLVX-MYRF-TET1,并且能在宫颈癌HeLa细胞中稳定过表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁妍		11	17	2.0	3.0
2	谭玉洁		14	52	5.0	6.0
6	沈艳		2	2	1.0	1.0
7	沈凤		3	7	2.0	2.0
8	闫海洋		2	2	1.0	1.0
9	徐殿琴		4	3	1.0	1.0