摘要:
目的 探讨17-烯丙胺-17-脱甲氧格尔得霉素(17-AAG) 对人绒癌JAR 细胞迁移和黏附的影响.方法 MTT 实验: 以5、10、20、40 μg/mL 浓度的17-AAG 处理绒癌JAR 细胞(实验组) ,设立空白对照组,空白对照组为与实验组相同体积的培养基,培养24 h后观察细胞形态,MTT 法检测细胞增殖抑制率,并计算IC50.划痕治愈实验: 以5、10 μg/mL 浓度的17-AAG 及空白对照组处理绒癌JAR 细胞(实验组) ,进行细胞划痕治愈实验,划痕后即刻及48 h后,拍照记录细胞划痕治愈情况,并计算划痕治愈率.Transwell实验:以5、10、20、40 μg/mL 浓度的17-AAG 处理绒癌JAR 细胞(实验组) ,设立空白对照组,培养12 h后,Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力.Western blot实验: 以5、10、20、40 μg/mL 浓度17-AAG 处理绒癌JAR 细胞(实验组) ,设立空白对照组,培养24 h后,蛋白免疫印迹(Western blot) 法检测细胞迁移黏附相关蛋白表达水平.结果 MTT 实验结果 显示,与空白对照组比较,实验组细胞增殖抑制率明显增加,呈浓度依赖性(P < 0. 05) ,24 h后IC50均值为11. 951;划痕治愈实验结果 显示,与对照组比较,实验组划痕覆盖面积明显降低(P < 0. 05);Transwell实验结果 显示,与空白对照组比较,实验组细胞穿膜数目逐渐降低,呈浓度依赖性(P < 0. 05);Western blot实验结果 显示,与空白对照组比较,实验组E-cadherin蛋白表达水平显著增加(P < 0. 05) ,同时N-cadherin、β-catenin蛋白表达水平降低(P < 0. 05) .结论 17-AAG 能够抑制人绒癌JAR细胞增殖,并通过EMT 信号通路上调E-cadherin蛋白,下调N-cadherin、β-catenin蛋白的表达抑制人绒癌JAR 细胞的迁移和黏附.